Nature.com වෙත පිවිසීම ගැන ඔබට ස්තුතියි.ඔබ භාවිතා කරන බ්‍රවුසර අනුවාදයට සීමිත CSS සහය ඇත.හොඳම අත්දැකීම සඳහා, ඔබ යාවත්කාලීන කළ බ්‍රවුසරයක් භාවිතා කරන ලෙස අපි නිර්දේශ කරමු (නැතහොත් Internet Explorer හි අනුකූලතා ප්‍රකාරය අක්‍රිය කරන්න).මේ අතරතුර, අඛණ්ඩ සහාය සහතික කිරීම සඳහා, අපි විලාසිතා සහ JavaScript නොමැතිව වෙබ් අඩවිය ලබා දෙන්නෙමු.
පර්යන්ත පෙනහළු සම්ප්‍රේෂණයට චිකිත්සක බලපෑමක් නොමැති බැවින් පෙනහළු සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් ප්‍රතිකාර සඳහා ජාන වාහකයන් සන්නායක ගුවන් මාර්ග වෙත ඉලක්ක කළ යුතුය.වෛරස් සම්ප්‍රේෂණයේ කාර්යක්ෂමතාව වාහකයාගේ පදිංචි කාලය සමඟ කෙලින්ම සම්බන්ධ වේ.කෙසේ වෙතත්, ජාන වාහක වැනි බෙදා හැරීමේ තරල ස්වභාවිකවම ආශ්වාසයේදී ඇල්වෙයෝලි තුළට විසරණය වන අතර ඕනෑම හැඩයක චිකිත්සක අංශු ශ්ලේෂ්මල ප්‍රවාහනය මගින් වේගයෙන් ඉවත් කරනු ලැබේ.ශ්වසන පත්රිකාවේ ජාන වාහකයන්ගේ පදිංචි කාලය දීර්ඝ කිරීම වැදගත් නමුත් සාක්ෂාත් කර ගැනීමට අපහසු වේ.ශ්වසන පත්රිකාවේ මතුපිටට යොමු කළ හැකි වාහක-සංයුක්ත චුම්බක අංශු කලාපීය ඉලක්කගත කිරීම වැඩිදියුණු කළ හැකිය.vivo රූපකරණයේ ඇති ගැටළු හේතුවෙන්, ව්‍යවහාරික චුම්භක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ වාතයේ මතුපිට ඇති එවැනි කුඩා චුම්භක අංශු වල හැසිරීම දුර්වල ලෙස වටහාගෙන ඇත.මෙම අධ්‍යයනයේ පරමාර්ථය වූයේ vivo හි තනි සහ තොග අංශු වල ගතිකය සහ හැසිරීම් රටා අධ්‍යයනය කිරීම සඳහා නිර්වින්දනය කරන ලද මීයන්ගේ ශ්වාසනාලයේ චුම්භක අංශු මාලාවක චලනය vivo තුළ දෘශ්‍යමාන කිරීම සඳහා synchrotron රූප භාවිතා කිරීමයි.චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ ලෙන්ටිවෛරස් චුම්බක අංශු බෙදා හැරීම මීයාගේ ශ්වසන පත්‍රයේ සම්ප්‍රේෂණයේ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි කරයිද යන්න අපි පසුව තක්සේරු කළෙමු.Synchrotron X-ray රූප මගින් vitro සහ vivo තුළ ස්ථාවර සහ චලනය වන චුම්බක ක්ෂේත්‍රවල චුම්බක අංශු වල හැසිරීම පෙන්නුම් කරයි.චුම්බක භාවිතයෙන් සජීවී ගුවන් මාර්ගවල මතුපිට අංශු පහසුවෙන් ඇදගෙන යා නොහැක, නමුත් ප්‍රවාහනයේදී තැන්පතු සංකේන්ද්‍රණය වන්නේ චුම්බක ක්ෂේත්‍රය ප්‍රබල වන දෘෂ්ටි ක්ෂේත්‍රයේ ය.චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ ලෙන්ටිවෛරස් චුම්බක අංශු ලබා දුන් විට පරිවර්තන කාර්යක්ෂමතාව හය ගුණයකින් වැඩි විය.එකට ගත්විට, මෙම ප්‍රතිඵල යෝජනා කරන්නේ, ලෙන්ටිවෛරස් චුම්බක අංශු සහ චුම්බක ක්ෂේත්‍ර, vivo හි සන්නායක ගුවන් මාර්ගවල ජාන දෛශික ඉලක්ක කිරීම සහ සම්ප්‍රේෂණ මට්ටම් වැඩිදියුණු කිරීම සඳහා වටිනා ප්‍රවේශයන් විය හැකි බවයි.
සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් (CF) හටගන්නේ CF ට්‍රාන්ස්මෙම්බ්‍රේන් සන්නායක නියාමකය (CFTR) ලෙස හඳුන්වන එක් ජානයක වෙනස්කම් මගිනි.CFTR ප්‍රෝටීනය යනු සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් වල ව්‍යාධිජනක ප්‍රධාන ස්ථානයක් වන වාතය ඇතුළු ශරීරය පුරා ඇති බොහෝ අපිච්ඡද සෛලවල පවතින අයන නාලිකාවකි.CFTR හි දෝෂ හේතුවෙන් අසාමාන්‍ය ජල ප්‍රවාහනය, වාතයේ මතුපිට විජලනය සහ වාතයේ මතුපිට තරල ස්ථරය (ASL) ගැඹුර අඩු වේ.එය ආශ්වාස කරන අංශු සහ රෝග කාරක වල ශ්වසන මාර්ගය ඉවත් කිරීමට mucociliary Transport (MCT) පද්ධතියේ හැකියාව ද අඩාල කරයි.අපගේ ඉලක්කය වන්නේ CFTR ජානයේ නිවැරදි පිටපත ලබා දීමට සහ ASL, MCT සහ පෙනහළු සෞඛ්‍යය වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා lentiviral (LV) ජාන ප්‍රතිකාරයක් සංවර්ධනය කිරීම සහ vivo1 හි මෙම පරාමිතීන් මැනිය හැකි නව තාක්ෂණයන් අඛණ්ඩව සංවර්ධනය කිරීමයි.
LV දෛශික යනු සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් ජාන ප්‍රතිකාරය සඳහා ප්‍රමුඛ අපේක්ෂකයන්ගෙන් එකකි, ප්‍රධාන වශයෙන්, ප්‍රධාන වශයෙන් ඔවුන්ට චිකිත්සක ජානය වාතයේ බාසල් සෛල (වායු මාර්ග ප්‍රාථමික සෛල) වෙත ස්ථිරවම ඒකාබද්ධ කළ හැකි බැවිනි.මෙය වැදගත් වන්නේ සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් ආශ්‍රිත ක්‍රියාකාරී ජාන නිවැරදි කරන ලද ගුවන් මාර්ග මතුපිට සෛල වලට වෙනස් කිරීමෙන් සාමාන්‍ය සජලනය සහ ශ්ලේෂ්මල නිෂ්කාශනය ප්‍රතිස්ථාපනය කළ හැකි නිසා ජීවිත කාලය පුරාම ප්‍රතිලාභ ලබා දෙන බැවිනි.CF හි පෙනහළු සම්බන්ධ වීම ආරම්භ වන බැවින්, LV දෛශික සන්නායක ගුවන් මාර්ග වලට එරෙහිව යොමු කළ යුතුය.දෛශිකය පෙනහළු තුළට ගැඹුරට ලබා දීමෙන් ඇල්ටෙයෝලර් සම්ප්‍රේෂණය ඇති විය හැක, නමුත් මෙය සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් තුළ චිකිත්සක බලපෑමක් නැත.කෙසේ වෙතත්, දරු ප්‍රසූතියෙන් පසු ආශ්වාස කරන විට ජාන වාහක වැනි තරල ස්වාභාවිකවම ඇල්වෙයෝලි තුළට සංක්‍රමණය වන අතර චිකිත්සක අංශු MCT මගින් මුඛ කුහරය තුළට වේගයෙන් පිට කරයි.LV සම්ප්‍රේෂණයේ කාර්යක්ෂමතාව සෘජුවම සම්බන්ධ වන්නේ දෛශිකය ඉලක්කගත සෛලවලට සමීපව පවතින සෛලීය අවශෝෂණයට ඉඩ සලසන කාල සීමාවට - “පදිංච් කාලය” 5 සාමාන්‍ය කලාපීය වායු ප්‍රවාහයෙන් මෙන්ම ශ්ලේෂ්මල සහ MCT අංශු සම්බන්ධීකරණය කිරීමෙන් පහසුවෙන් කෙටි කළ හැකිය.සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් සඳහා, මෙම ප්‍රදේශයේ ඉහළ මට්ටමේ සම්ප්‍රේෂණයක් ලබා ගැනීම සඳහා ගුවන් මාර්ගවල LV නේවාසික කාලය දීර්ඝ කිරීමේ හැකියාව වැදගත් වන නමුත් මෙතෙක් එය අභියෝගාත්මක වී ඇත.
මෙම බාධකය ජය ගැනීම සඳහා, LV චුම්බක අංශු (MPs) අනුපූරක ආකාර දෙකකින් උපකාර කළ හැකි බව අපි යෝජනා කරමු.පළමුව, ඉලක්ක වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා සහ ජාන වාහක අංශු ශ්වසන මාර්ගයේ දකුණු ප්රදේශයේ සිටීමට උපකාර කිරීම සඳහා වාතයේ මතුපිටට චුම්බකයක් මගින් මඟ පෙන්විය හැකිය;සහ ASL) සෛල ස්ථරයට ගමන් කිරීම 6. ප්‍රතිදේහ, රසායනික චිකිත්සක ඖෂධ හෝ සෛල පටලවලට සම්බන්ධ වන හෝ ඒවායේ අදාළ සෛල මතුපිට ප්‍රතිග්‍රාහකවලට බන්ධනය වන සහ පිළිකා ඇති ස්ථානවල එකතු වන වෙනත් කුඩා අණු සමඟ සම්බන්ධ වන විට MPs ඉලක්කගත ඖෂධ බෙදා හැරීමේ වාහන ලෙස බහුලව භාවිතා වේ. ස්ථිතික විදුලිය තිබීම.පිළිකා ප්‍රතිකාර සඳහා චුම්බක ක්ෂේත්‍ර 7. දෝලනය වන චුම්බක ක්ෂේත්‍රවලට නිරාවරණය වන විට මන්ත්‍රීවරුන් රත් කිරීමෙන් පිළිකා සෛල විනාශ කිරීම වෙනත් “අධි තාප” ක්‍රම ඉලක්ක කර ඇත.සෛල තුළට DNA මාරු කිරීම වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් සංක්‍රමණ කාරකයක් ලෙස භාවිතා කරන චුම්බක මාරු කිරීමේ මූලධර්මය, සම්ප්‍රේෂණය කිරීමට අපහසු සෛල රේඛා සඳහා වෛරස් නොවන සහ වෛරස් ජාන දෛශික පරාසයක් භාවිතා කරමින් vitro හි බහුලව භාවිතා වේ. ..ස්ථිතික චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ LV MP in vitro මානව බ්‍රොන්පයිල් එපිටිලියම් සෛල රේඛාවකට බෙදා හැරීමත් සමඟ LV චුම්බක සම්ප්‍රේෂණයේ කාර්යක්ෂමතාවය තහවුරු කරන ලද අතර, LV දෛශිකය සමඟ පමණක් සසඳන විට සම්ප්‍රේෂණ කාර්යක්ෂමතාව 186 ගුණයකින් වැඩි කරයි.cystic fibrosis sputum10 ඉදිරියේ චුම්බක සංක්‍රමණය වායු-ද්‍රව අතුරුමුහුණත් සංස්කෘතීන්හි LV සම්ප්‍රේෂණය 20 ගුණයකින් වැඩි කරන ලද cystic fibrosis හි in vitro ආකෘතියකටද LV MT යොදන ලදී.කෙසේ වෙතත්, vivo ඉන්ද්‍රිය චුම්භක සම්ප්‍රේෂණයට සාපේක්ෂව අඩු අවධානයක් ලැබී ඇති අතර 11,12,13,14,15, විශේෂයෙන් පෙනහළු 16,17 හි සත්ව අධ්‍යයනයන් කිහිපයකින් පමණක් ඇගයීමට ලක් කර ඇත.කෙසේ වෙතත්, සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් තුළ පෙනහළු ප්‍රතිකාරයේදී චුම්භක මාරු කිරීමේ හැකියාව පැහැදිලිය.ටැන් සහ අල්.(2020) ප්‍රකාශ කළේ “චුම්බක නැනෝ අංශු ඵලදායි පුඵ්ඵුසීය බෙදාහැරීම පිළිබඳ වලංගු කිරීමේ අධ්‍යයනයක් මගින් සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් රෝගීන්ගේ සායනික ප්‍රතිඵල වැඩිදියුණු කිරීම සඳහා අනාගත CFTR ආශ්වාස උපාය මාර්ග සඳහා මග පාදනු ඇති” බවයි.
ව්‍යවහාරික චුම්භක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ ශ්වසන පත්‍රිකාවේ මතුපිට කුඩා චුම්බක අංශු වල හැසිරීම දෘශ්‍යමාන කිරීම සහ අධ්‍යයනය කිරීම දුෂ්කර වන අතර එබැවින් ඒවා දුර්වල ලෙස වටහාගෙන ඇත.වෙනත් අධ්‍යයනයන්හිදී, වායු නාලිකා මතුපිට සජලනය සෘජුව මැනීම සඳහා අපි ASL18 ගැඹුරේ සහ MCT19 හැසිරීම් වල vivo වෙනස්කම් වල ආක්‍රමණශීලී නොවන රූප සහ මිනිත්තු ප්‍රමාණ කිරීම සඳහා Synchrotron ප්‍රචාරණය පදනම් වූ අදියර ප්‍රතිවිරුද්ධ X-Ray Imaging (PB-PCXI) ක්‍රමයක් සකස් කර ඇත. සහ මුල් දර්ශක ප්රතිකාර සඵලතාවය ලෙස භාවිතා වේ.මීට අමතරව, අපගේ MCT ලකුණු කිරීමේ ක්‍රමය PB-PCXI21 සමඟ පෙනෙන MCT සලකුණු ලෙස ඇලුමිනා හෝ ඉහළ වර්තන දර්ශක වීදුරු වලින් සමන්විත 10-35 µm විෂ්කම්භයක් සහිත අංශු භාවිතා කරයි.මෙම ක්‍රම දෙකම මන්ත්‍රීවරුන් ඇතුළු අංශු වර්ග පරාසයක් නිරූපණය කිරීම සඳහා සුදුසු වේ.
ඉහළ අවකාශීය සහ තාවකාලික විභේදනය හේතුවෙන්, අපගේ PB-PCXI-පාදක ASL සහ MCT පරීක්ෂණ MP ජාන බෙදා හැරීමේ ක්‍රම තේරුම් ගැනීමට සහ ප්‍රශස්ත කිරීමට vivo තුළ ඇති තනි සහ තොග අංශුවල ගතිකත්වය සහ හැසිරීම් රටා අධ්‍යයනය කිරීමට හොඳින් ගැලපේ.අප මෙහි භාවිතා කරන ප්‍රවේශය පදනම් වී ඇත්තේ SPring-8 BL20B2 කදම්භ රේඛාව භාවිතයෙන් අපගේ අධ්‍යයනයන් මත වන අතර, එහිදී අපි නිරීක්ෂණය කරන ලද අපගේ විෂම ජාන ප්‍රකාශන රටා පැහැදිලි කිරීමට උපකාරී වන පරිදි මීයන්ගේ නාසික සහ පෙනහළු වාතයට ව්‍යාජ දෛශික මාත්‍රාවක් ලබා දීමෙන් පසු තරල චලනය දෘශ්‍යමාන කළෙමු. අපේ ජානයේ.3.4 වාහක මාත්‍රාවක් සහිත සත්ව අධ්‍යයනය.
මෙම අධ්‍යයනයේ අරමුණ වූයේ සජීවී මීයන්ගේ ශ්වාසනාලයේ මන්ත්‍රීවරුන් මාලාවක vivo චලනයන් දෘශ්‍යමාන කිරීම සඳහා PB-PCXI සමමුහුර්තකරණය භාවිතා කිරීමයි.මෙම PB-PCXI රූප අධ්‍යයනයන් MP ශ්‍රේණි, චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය සහ MP චලනය කෙරෙහි ඒවායේ බලපෑම තීරණය කිරීම සඳහා ස්ථානය පරීක්ෂා කිරීමට සැලසුම් කර ඇත.අපි උපකල්පනය කළේ බාහිර චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් බෙදා හරින ලද MF රැඳී සිටීමට හෝ ඉලක්කගත ප්‍රදේශයට යාමට උපකාර වනු ඇති බවයි.මෙම අධ්‍යයනයන් මගින් තැන්පත් වීමෙන් පසු ශ්වාසනාලයේ ඉතිරිව ඇති අංශු ප්‍රමාණය උපරිම කරන චුම්බක වින්‍යාසයන් තීරණය කිරීමට ද අපට හැකි විය.දෙවන අධ්‍යයන මාලාවකදී, ගුවන් මාර්ග ඉලක්ක කිරීමේ සන්දර්භය තුළ LV-MPs බෙදා හැරීම ප්‍රතිඵලයක් වනු ඇතැයි උපකල්පනය කරමින්, මී ගුවන් මාර්ග වෙත LV-MPs vivo බෙදා හැරීමේ ප්‍රතිඵලයක් ලෙස සම්ප්‍රේෂණ රටාව නිරූපණය කිරීමට මෙම ප්‍රශස්ත වින්‍යාසය භාවිතා කිරීමට අපි ඉලක්ක කළෙමු. LV සම්ප්‍රේෂණ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි කිරීමේදී..
සියලුම සත්ව අධ්‍යයනයන් ඇඩිලේඩ් විශ්ව විද්‍යාලය (M-2019-060 සහ M-2020-022) සහ SPring-8 Synchrotron සත්ව ආචාර ධර්ම කමිටුව විසින් අනුමත කරන ලද ප්‍රොටෝකෝලවලට අනුකූලව සිදු කරන ලදී.ARRIVE හි නිර්දේශයන්ට අනුකූලව අත්හදා බැලීම් සිදු කරන ලදී.
සියලුම x-ray පින්තූර ජපානයේ SPring-8 synchrotron හි BL20XU beamline හි පෙර විස්තර කර ඇති ආකාරයට සමාන සැකසුමකින් ලබා ගන්නා ලදී.කෙටියෙන් කිවහොත්, පර්යේෂණාත්මක පෙට්ටිය සමමුහුර්ත ගබඩා වළල්ලේ සිට මීටර් 245 ක් දුරින් පිහිටා ඇත.අදියර පරස්පර බලපෑම් ඇති කිරීම සඳහා අංශු රූප අධ්‍යයනය සඳහා නියැදි සිට අනාවරක දුර මීටර් 0.6 ක් සහ vivo රූප අධ්‍යයනය සඳහා මීටර් 0.3 ක් භාවිතා වේ.25 keV ශක්තියක් සහිත ඒකවර්ණ කදම්භයක් භාවිතා කරන ලදී.sCMOS අනාවරකයකට සම්බන්ධ කරන ලද ඉහළ විභේදන X-ray පරිවර්තකය (SPring-8 BM3) භාවිතයෙන් පින්තූර ලබා ගන්නා ලදී.පරිවර්තකය 10 µm ඝන සින්ටිලේටරයක් ​​(Gd3Al2Ga3O12) භාවිතයෙන් X-කිරණ දෘශ්‍ය ආලෝකය බවට පරිවර්තනය කරයි, පසුව එය × 10 (NA 0.3) අන්වීක්ෂයක් භාවිතයෙන් sCMOS සංවේදකය වෙත යොමු කෙරේ.sCMOS අනාවරකය Orca-Flash4.0 (Hamamatsu Photonics, Japan) වන අතර එහි අරාව ප්‍රමාණය 2048 × 2048 පික්සල සහ අමු පික්සල ප්‍රමාණය 6.5 × 6.5 µm විය.මෙම සැකසුම මගින් ඵලදායි සමස්ථානික පික්සල් ප්‍රමාණය 0.51 µm සහ දළ වශයෙන් 1.1 mm × 1.1 mm දර්ශන ක්ෂේත්‍රයක් ලබා දෙයි.100 ms නිරාවරණ කාලසීමාව තෝරාගෙන ඇත්තේ හුස්ම ගැනීම නිසා ඇතිවන චලන කෞතුක වස්තු අවම කරන අතරම වාත මාර්ග ඇතුළත සහ පිටත චුම්බක අංශුවල සංඥා-ශබ්ද අනුපාතය උපරිම කිරීම සඳහා ය.vivo අධ්‍යයනයන් සඳහා, නිරාවරණ අතර X-ray කදම්භය අවහිර කිරීමෙන් විකිරණ මාත්‍රාව සීමා කිරීම සඳහා X-ray මාර්ගයේ වේගවත් X-ray ෂටරයක් ​​තබා ඇත.
BL20XU රූපකරණ කුටිය ජෛව ආරක්ෂණ මට්ටම 2 සහතික කර නොමැති නිසා LV මාධ්‍ය කිසිදු SPring-8 PB-PCXI රූප අධ්‍යයනයක භාවිතා නොකළේය.ඒ වෙනුවට, අපි ප්‍රමාණයන්, ද්‍රව්‍ය, යකඩ සාන්ද්‍රණය සහ යෙදුම් පරාසයක් ආවරණය වන පරිදි වාණිජ වෙළෙන්දන් දෙදෙනෙකුගෙන් හොඳින් සංලක්ෂිත මන්ත්‍රීවරුන් පරාසයක් තෝරා ගත්තෙමු - පළමුව වීදුරු කේශනාලිකා වල මන්ත්‍රීවරුන්ගේ චලනය කෙරෙහි චුම්බක ක්ෂේත්‍ර බලපාන්නේ කෙසේද යන්න තේරුම් ගැනීමට, පසුව සජීවී ගුවන් මාර්ග.මතුපිට.MP හි ප්‍රමාණය 0.25 සිට 18 µm දක්වා වෙනස් වන අතර විවිධ ද්‍රව්‍ය වලින් සාදා ඇත (වගුව 1 බලන්න), නමුත් MP හි ඇති චුම්බක අංශු වල ප්‍රමාණය ඇතුළුව එක් එක් නියැදියක සංයුතිය නොදනී.අපගේ විස්තීර්ණ MCT අධ්‍යයන 19, 20, 21, 23, 24 මත පදනම්ව, 5 µm දක්වා MPs tracheal airway මතුපිට දැකිය හැකි යැයි අපි අපේක්ෂා කරමු, උදාහරණයක් ලෙස, MP චලනයේ වැඩි දෘශ්‍යතාව බැලීමට අනුක්‍රමික රාමු අඩු කිරීමෙන්.0.25 µm හි තනි MP එකක් රූපකරණ උපාංගයේ විභේදනයට වඩා කුඩා වේ, නමුත් PB-PCXI ඒවායේ පරිමාමිතික ප්‍රතිවිරෝධය සහ ඒවා තැන්පත් කිරීමෙන් පසු තැන්පත් කර ඇති මතුපිට ද්‍රවයේ චලනය හඳුනා ගැනීමට අපේක්ෂා කෙරේ.
වගුවේ එක් එක් මන්ත්‍රීවරයා සඳහා සාම්පල.1 මිලිමීටර් 0.63 ක අභ්යන්තර විෂ්කම්භයක් සහිත 20 μl වීදුරු කේශනාලිකා (Drummond Microcaps, PA, USA) සකස් කරන ලදී.කෝපුස්කියුලර් අංශු ජලයේ ඇති අතර CombiMag අංශු නිෂ්පාදකයාගේ හිමිකාර ද්‍රවයේ ඇත.සෑම නලයක්ම දියරයෙන් අඩක් පුරවා ඇත (ආසන්න වශයෙන් 11 µl) සහ සාම්පල රඳවනය මත තබා ඇත (රූපය 1 බලන්න).වීදුරු කේශනාලිකා පිළිවෙලින් රූප කුටියේ වේදිකාවේ තිරස් අතට තබා ද්‍රවයේ දාරවල ස්ථානගත කර ඇත.මිලිමීටර් 19 විශ්කම්භය (මි.මී. 28 දිග) නිකල්-ෂෙල් චුම්බකයක් දුර්ලභ පෘථිවි, නියෝඩියමියම්, යකඩ සහ බෝරෝන් (NdFeB) (N35, cat. No. LM1652, Jaycar Electronics, Australia) 1.17 T ක නැවත පණ ගැන්වීමකින් සාදන ලදී. ලබා ගැනීම සඳහා වෙනම මාරු කිරීමේ වගුවක් විදැහුම්කරණයේදී ඔබේ ස්ථානය දුරස්ථව වෙනස් කරන්න.චුම්බකය නියැදියට වඩා මිලිමීටර 30ක් පමණ ඉහළින් ස්ථානගත කර තත්පරයට රාමු 4 බැගින් ලබා ගන්නා විට X-කිරණ ප්‍රතිබිම්බය ආරම්භ වේ.රූපගත කිරීමේදී, චුම්බකය වීදුරු කේශනාලිකා නලයට සමීප කර (මි.මී. 1 ක පමණ දුරකින්) පසුව ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය සහ පිහිටීමෙහි බලපෑම තක්සේරු කිරීම සඳහා නළය දිගේ ගෙන යන ලදී.
xy නියැදියේ පරිවර්තන අදියරේදී වීදුරු කේශනාලිකාවල MP සාම්පල අඩංගු in vitro imaging සැකසුම.X-ray කදම්භයේ මාර්ගය රතු තිත් රේඛාවකින් සලකුණු කර ඇත.
මන්ත්‍රීවරුන්ගේ අභ්‍යන්තර දෘශ්‍යතාව තහවුරු වූ පසු, ඔවුන්ගේ උප කුලකයක් වල් වර්ගයේ ගැහැණු Wistar albino මීයන් (~ සති 12, ~ 200 g) මත vivo තුළ පරීක්ෂා කරන ලදී.Medetomidine 0.24 mg/kg (Domitor®, Zenoaq, Japan), midazolam 3.2 mg/kg (Dormicum®, Astellas Pharma, Japan) සහ butorphanol 4 mg/kg (Vetorphale®, Meiji Seika).ඉන්ට්‍රාපෙරිටෝනියල් එන්නත් කිරීම මගින් මීයන් ෆාමා (ජපානය) මිශ්‍රණයෙන් නිර්වින්දනය කරන ලදී.නිර්වින්දනය කිරීමෙන් පසුව, ඔවුන් ස්වසනාලය වටා ඇති ලොම් ඉවත් කර, අන්තරාසර්ග නලයක් (ET; 16 Ga අභ්‍යන්තර කැනියුලා, ටෙරුමෝ BCT) ඇතුළු කර, තාප බෑගයක් සහිත අභිරුචි-සාදන ලද රූප තහඩුවක උඩු යටිකුරු කර ඒවා නිශ්චල කිරීම මගින් නිරූපණය සඳහා සූදානම් කරන ලදී. ශරීර උෂ්ණත්වය පවත්වා ගැනීමට.22. රූප සටහන 2a හි පෙන්වා ඇති පරිදි x-ray රූපයේ තිරස් අතට ස්වසනාලය පෙළගැස්වීම සඳහා රූප තහඩුව කුඩා කෝණයකින් රූප පෙට්ටියේ නියැදි වේදිකාවට අමුණා ඇත.
(අ) SPring-8 රූපකරණ ඒකකයේ vivo රූප සැකසීමේදී, X-ray කදම්භ මාර්ගය රතු තිත් රේඛාවකින් සලකුණු කර ඇත.(b,c) ට්‍රේචල් චුම්බක ස්ථානගත කිරීම විකලාංග ලෙස සවිකර ඇති IP කැමරා දෙකක් භාවිතයෙන් දුරස්ථව සිදු කරන ලදී.තිරය ​​මත රූපයේ වම් පැත්තේ, ඔබට හිස අල්ලාගෙන සිටින වයර් ලූපය සහ ET බටය තුළ ස්ථාපනය කර ඇති බෙදාහැරීමේ කැනියුලාව දැකිය හැකිය.
100 µl වීදුරු සිරින්ජයක් භාවිතා කරමින් දුරස්ථ පාලක සිරින්ජ පොම්ප පද්ධතියක් (UMP2, World Precision Instruments, Sarasota, FL) 30 Ga ඉඳිකටුවක් භාවිතයෙන් PE10 නලයකට (0.61 mm OD, 0.28 mm ID) සම්බන්ධ කරන ලදී.එන්ඩොට්‍රාචල් නළය ඇතුල් කිරීමේදී තුණ්ඩය ශ්වාසනාලයේ නිවැරදි ස්ථානයේ ඇති බව සහතික කිරීම සඳහා නළය සලකුණු කරන්න.ක්ෂුද්‍ර පොම්පයක් භාවිතයෙන්, සිරින්ජ ජලනල ඉවත් කරන ලද අතර, නළයේ කෙළවර බෙදා හැරීමට නියමිත MP සාම්පලයේ ගිල්වා ඇත.පසුව පටවන ලද බෙදාහැරීමේ නළය එන්ඩොට්‍රාචල් නලයට ඇතුළු කර, අපගේ අපේක්ෂිත ව්‍යවහාරික චුම්බක ක්ෂේත්‍රයේ ප්‍රබලම කොටසෙහි තුඩ තබයි.අපගේ Arduino මත පදනම් වූ කාල පෙට්ටියට සම්බන්ධ හුස්ම අනාවරකයක් භාවිතයෙන් රූප ලබා ගැනීම පාලනය කරන ලද අතර, සියලුම සංඥා (උදා, උෂ්ණත්වය, ශ්වසනය, ෂටරය විවෘත/වසා දැමීම සහ රූප ලබා ගැනීම) Powerlab සහ LabChart (AD Instruments, Sydney, Australia) භාවිතයෙන් පටිගත කරන ලදී. 22 නිරූපනය කිරීමේදී නිවාස නොමැති වූ විට, IP කැමරා දෙකක් (Panasonic BB-SC382) එකිනෙකට ආසන්න වශයෙන් 90°ක ස්ථානගත කර ඇති අතර රූපගත කිරීමේදී ස්වසනාලයට සාපේක්ෂව චුම්බකයේ පිහිටීම පාලනය කිරීමට භාවිතා කරන ලදී (රූපය 2b, c).චලන පුරාවස්තු අවම කිරීම සඳහා, පර්යන්ත ශ්වසන ප්‍රවාහ සානුව තුළ හුස්මකට එක් රූපයක් ලබා ගන්නා ලදී.
චුම්බකය දෙවන අදියරට අනුයුක්ත කර ඇති අතර එය රූප සිරුරේ පිටත දුරස්ථව පිහිටා ඇත.චුම්බකයේ විවිධ පිහිටීම් සහ වින්‍යාසයන් පරීක්‍ෂා කරන ලදී, ඇතුළුව: ට්‍රේචාට ඉහළින් ආසන්න වශයෙන් 30 ° ක කෝණයක තබා ඇත (වින්‍යාසයන් රූප 2a සහ 3a හි පෙන්වා ඇත);එක් චුම්බකයක් සතාට ඉහළින් සහ අනෙක පහතින්, ආකර්ෂණය සඳහා ධ්‍රැව පිහිටුවා ඇත (රූපය 3b)., සත්වයාට ඉහලින් එක් චුම්බකයක් සහ පහළින් එකක්, විකර්ෂණය සඳහා පිහිටුවා ඇති ධ්‍රැව (රූපය 3c), සහ එක් චුම්බකයක් ඉහලින් සහ ස්වසනාලයට ලම්බකව (රූපය 3d).සතා සහ චුම්බකය සකසා සිරින්ජ පොම්පයට පරීක්‍ෂාවට ලක්වන මන්ත්‍රී පූරණය කිරීමෙන් පසු, රූප ලබා ගැනීමේදී 4 µl/sec අනුපාතයකින් 50 µl මාත්‍රාවක් ලබා දෙන්න.ඉන්පසුව චුම්බකය ස්වසනාලය දිගේ හෝ එහාට මෙහාට ගෙන යමින් රූප ලබා ගැනීම දිගටම සිදු කරයි.
vivo රූපකරණය සඳහා චුම්බක වින්‍යාසය (a) ආසන්න වශයෙන් 30° කෝණයකින් trachea ට ඉහළින් එක් චුම්බකයක්, (b) ආකර්ෂණය සඳහා වින්‍යාස කර ඇති චුම්බක දෙකක්, (c) විකර්ෂණය සඳහා වින්‍යාස කර ඇති චුම්බක දෙකක්, (d) ඉහතින් සහ ලම්බකව එක් චුම්බකයක් ශ්වාසනාලය.නිරීක්ෂකයා ස්වසනාලය හරහා මුඛයේ සිට පෙණහලු දක්වා පහළට බැලූ අතර එක්ස් කිරණ කදම්භය මීයාගේ වම් පැත්ත හරහා ගොස් දකුණු පසින් පිටවිය.චුම්බකය එක්ස් කිරණ කදම්භයේ දිශාවට ශ්වසන මාර්ගය දිගේ හෝ වම සහ දකුණට ඉහළින් ගමන් කරයි.
ශ්වසනය සහ හෘද ස්පන්දනය මිශ්‍ර නොවීම තුළ වාතයේ ඇති අංශුවල දෘශ්‍යතාව සහ හැසිරීම තීරණය කිරීමට ද අපි උත්සාහ කළෙමු.එබැවින්, නිරූපණ කාලය අවසානයේදී, පෙන්ටොබාර්බිටල් අධික මාත්‍රාව හේතුවෙන් සතුන් මානුෂීය ලෙස ඝාතනය කරන ලදී (Somnopentyl, Pitman-Moore, Washington Crossing, USA; ~65 mg/kg ip).සමහර සතුන් නිරූපණ වේදිකාවේ තබා ඇති අතර, හුස්ම ගැනීම සහ හෘද ස්පන්දනය නැවැත්වීමෙන් පසු, රූපගත කිරීමේ ක්‍රියාවලිය නැවත නැවතත් සිදු කරන ලද අතර, ගුවන් මාර්ග මතුපිට කිසිදු මන්ත්‍රීවරයෙකු නොපෙනේ නම්, MP හි අතිරේක මාත්‍රාවක් එකතු කරන ලදී.
ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ලැබෙන පින්තූර පැතලි සහ අඳුරු ක්ෂේත්‍ර සඳහා නිවැරදි කර පසුව MATLAB (R2020a, The Mathworks) හි ලියා ඇති අභිරුචි පිටපතක් භාවිතයෙන් (තත්පරයට රාමු 20; ශ්වසන වේගය අනුව සාමාන්‍ය වේගය 15-25 ×) චිත්‍රපටයකට එකලස් කරන ලදී.
LV ජාන දෛශික බෙදාහැරීම පිළිබඳ සියලුම අධ්‍යයනයන් ඇඩිලේඩ් විශ්ව විද්‍යාලයේ රසායනාගාර සත්ව පර්යේෂණ මධ්‍යස්ථානයේදී සිදු කරන ලද අතර චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ LV-MP බෙදා හැරීම vivo තුළ ජාන හුවමාරුව වැඩි දියුණු කළ හැකිද යන්න තක්සේරු කිරීමට SPring-8 අත්හදා බැලීමේ ප්‍රතිඵල භාවිතා කිරීම අරමුණු කර ගෙන ඇත. .MF සහ චුම්බක ක්ෂේත්‍රයේ බලපෑම් ඇගයීම සඳහා සතුන් කණ්ඩායම් දෙකකට ප්‍රතිකාර කරන ලදී: එක් කණ්ඩායමක් LV MF සමඟ චුම්බක ස්ථානගත කිරීමකින් එන්නත් කරන ලද අතර අනෙක් කණ්ඩායමට චුම්බකයක් නොමැතිව LV MF සමඟ පාලන කණ්ඩායමක් එන්නත් කරන ලදී.
LV ජාන දෛශික කලින් විස්තර කරන ලද ක්රම 25, 26 භාවිතා කර ජනනය කර ඇත.LacZ දෛශිකය MPSV සංඝටක ප්‍රවර්ධකය (LV-LacZ) විසින් මෙහෙයවනු ලබන න්‍යෂ්ටික දේශීයකරණය කරන ලද බීටා-ග්ලැක්ටොසිඩේස් ජානයක් ප්‍රකාශ කරයි, එය සම්ප්‍රේෂණය කරන ලද සෛලවල නිල් ප්‍රතික්‍රියා නිෂ්පාදනයක් නිපදවයි, පෙනහළු පටකවල ඉදිරිපස සහ කොටස්වල දෘශ්‍යමාන වේ.TU/ml හි ටයිටරය ගණනය කිරීම සඳහා hemocytometer භාවිතා කරමින් LacZ-ධනාත්මක සෛල සංඛ්‍යාව අතින් ගණනය කිරීම මගින් සෛල සංස්කෘතීන් තුළ ටයිටරේෂන් සිදු කරන ලදී.වාහකයන් -80°C දී ක්‍රයෝප්‍රසර්ඩ් කර, භාවිතයට පෙර දියකර, 1:1 මිශ්‍ර කර, ප්‍රසූතියට පෙර අවම වශයෙන් විනාඩි 30ක් අයිස් මත තබා CombiMag වෙත බැඳේ.
සාමාන්‍ය Sprague Dawley මීයන් (n = 3/group, ~2-3 නිර්වින්දනය කරන ලද ip 0.4mg/kg medetomidine (Domitor, Ilium, Australia) සහ 60mg/kg ketamine (Ilium, Australia) මිශ්‍රණයක් සමඟ වයස මාස 1 දී ip ) එන්නත් කිරීම සහ ශල්‍ය නොවන මුඛ කැනියුලේෂන් 16 Ga අභ්‍යන්තර කැනියුලා සමඟ.ස්වසන මාර්ග පටක වලට LV සම්ප්‍රේෂණය ලැබෙන බව සහතික කිරීම සඳහා, අපගේ කලින් විස්තර කරන ලද යාන්ත්‍රික කැළඹීම් ප්‍රොටෝකෝලය භාවිතා කර එය කොන්දේසිගත කර ඇති අතර එහි ස්වසන මාර්ග මතුපිට කම්බි කූඩයකින් අක්ෂීය ලෙස අතුල්ලනු ලැබේ (N-Circle, NTSE-022115 ඉඟියකින් තොරව නිටිනෝල් ගල් නිස්සාරකය ) -UDH, කුක් මෙඩිකල්, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) 30 p28.ඉන්පසුව, ජෛව ආරක්ෂණ කැබිනට්ටුවේ කැළඹීමෙන් විනාඩි 10 කට පමණ පසුව, LV-MP හි tracheal පරිපාලනය සිදු කරන ලදී.
මෙම අත්හදා බැලීමේදී භාවිතා කරන ලද චුම්බක ක්ෂේත්‍රය in vivo x-ray අධ්‍යයනයකට සමානව වින්‍යාස කර ඇති අතර, ආසවනය කරන ස්ටෙන්ට් කලම්ප සමඟ එම චුම්බක ස්වසනාලය මත රඳවා ඇත (රූපය 4).LV-MP හි 50 µl පරිමාවක් (2 x 25 µl aliquots) කලින් විස්තර කර ඇති පරිදි ජෙල්-ටිප් පයිප්පයක් භාවිතයෙන් trachea (n = 3 සතුන්) වෙත ලබා දෙන ලදී.පාලක කණ්ඩායම (n = 3 සතුන්) චුම්බකයක් භාවිතයෙන් තොරව එකම LV-MP ලබා ගත්තේය.මුදල් සම්භාරයක් වියදම් කිරීම අවසන් වූ පසු, කැනියුලාව එන්ඩොට්‍රාචල් නළයෙන් ඉවත් කර සත්වයා පිට කරයි.චුම්බකය ඉවත් කිරීමට පෙර විනාඩි 10 ක් පවතී.මීයන්ට මෙලොක්සිකාම් (1 ml/kg) (Ilium, Australia) සමඟ චර්මාභ්‍යන්තරව මාත්‍රා කරන ලද අතර පසුව 1 mg/kg atipamazole හයිඩ්‍රොක්ලෝරයිඩ් (Antisedan, Zoetis, Australia) intraperitoneal එන්නත් කිරීම මගින් නිර්වින්දනය ඉවත් කරන ලදී.නිර්වින්දනයෙන් සම්පූර්ණ සුවය ලැබෙන තෙක් මීයන් උණුසුම්ව තබා නිරීක්ෂණය කරන ලදී.
ජීව විද්‍යාත්මක ආරක්ෂණ කැබිනට්ටුවක LV-MP බෙදා හැරීමේ උපාංගය.ET බටයේ ලා අළු Luer-lock sleeve මුඛයෙන් නෙරා එන බවත්, රූපයේ දැක්වෙන ජෙල් පයිපෙට් තුඩය ET බටය හරහා ස්වසනාලයට අවශ්‍ය ගැඹුරට ඇතුළු කරන බවත් ඔබට දැක ගත හැකිය.
LV-MP පරිපාලන ක්‍රියා පටිපාටියෙන් සතියකට පසු, 100% CO2 ආශ්වාස කිරීමෙන් සතුන් මානුෂීය ලෙස බිලි දුන් අතර අපගේ සම්මත X-gal ප්‍රතිකාරය භාවිතයෙන් LacZ ප්‍රකාශනය තක්සේරු කරන ලදී.අන්තරාසර්ග නල ස්ථානගත කිරීම හේතුවෙන් යාන්ත්‍රික හානියක් හෝ තරල රඳවා තබා ගැනීමක් විශ්ලේෂණයට ඇතුළත් නොවන බව සහතික කිරීම සඳහා වඩාත් කෞඩල් කාටිලේජ වළලු තුන ඉවත් කරන ලදී.විශ්ලේෂණය සඳහා අර්ධ දෙකක් ලබා ගැනීම සඳහා සෑම ශ්වසන පත්රිකාවක්ම දිගට කපා ඇති අතර, ලුමිනල් මතුපිට දෘශ්යමාන කිරීම සඳහා Minutien ඉඳිකටුවක් (Fine Science Tools) භාවිතයෙන් සිලිකොන් රබර් (Sylgard, Dow Inc) අඩංගු කෝප්පයක තබා ඇත.DigiLite කැමරාවක් සහ TCapture මෘදුකාංගයක් (Tucsen Photonics, China) සමඟ Nikon අන්වීක්ෂයක් (SMZ1500) භාවිතා කරමින් ඉදිරිපස ඡායාරූපකරණය මගින් සම්ප්‍රේෂණය කරන ලද සෛලවල ව්‍යාප්තිය සහ ස්වභාවය තහවුරු කරන ලදී.පින්තූර 20x විශාලනයකින් (ශ්වාසනාලයේ සම්පූර්ණ පළල සඳහා උපරිම සැකසුම ඇතුළුව) ලබා ගන්නා ලදී, සම්පූර්ණ ස්වසනාලයේ දිග පියවරෙන් පියවර ප්‍රදර්ශනය වන අතර, පින්තූර “මැහුම්” කිරීමට ඉඩ දීම සඳහා එක් එක් රූපය අතර ප්‍රමාණවත් අතිච්ඡාදනය සපයයි.එක් එක් ට්‍රේචා වලින් ලැබෙන පින්තූර පසුව ප්ලැනර් චලන ඇල්ගොරිතම භාවිතයෙන් සංයුක්ත රූප සංස්කාරක අනුවාදය 2.0.3 (මයික්‍රොසොෆ්ට් පර්යේෂණ) භාවිතයෙන් තනි සංයුක්ත රූපයකට ඒකාබද්ධ කරන ලදී. 0.35 < Hue < 0.58 , සන්තෘප්තිය > 0.15 , සහ අගය < 0.7 යන සැකසීම් භාවිතා කරමින් 28 පෙර විස්තර කර ඇති පරිදි ස්වයංක්‍රීය MATLAB ස්ක්‍රිප්ට් (R2020a, MathWorks) භාවිතයෙන් එක් එක් සතෙකුගෙන් ලැබෙන tracheal සංයුක්ත රූප තුළ LacZ ප්‍රකාශනයේ ප්‍රදේශය ප්‍රමාණ කරන ලදී. 0.35 < Hue < 0.58 , සන්තෘප්තිය > 0.15 , සහ අගය < 0.7 හි සිටුවම් භාවිතා කරමින් 28 පෙර විස්තර කර ඇති පරිදි ස්වයංක්‍රීය MATLAB ස්ක්‍රිප්ට් (R2020a, MathWorks) භාවිතයෙන් එක් එක් සතෙකුගෙන් ලැබෙන tracheal සංයුක්ත රූප තුළ LacZ ප්‍රකාශනයේ ප්‍රදේශය ප්‍රමාණ කරන ලදී. Площадь экспрессии LacZ в составных изображениях трахеи от каждого животного была количественно определена с использованием автоматизированного сценария MATLAB (R2020a, MathWorks), как описано ранее28, с использованием настроек 0,35 <оттенок <0,58, насыщенность> 0,15 и значение <0 ,7. එක් එක් සත්වයාගේ සංයුක්ත ස්වසන රූපවල LacZ ප්‍රකාශනයේ ප්‍රදේශය කලින් විස්තර කර ඇති පරිදි ස්වයංක්‍රීය MATLAB ස්ක්‍රිප්ට් (R2020a, MathWorks) භාවිතයෙන් 0.35 සිටුවම් භාවිතා කර ප්‍රමාණනය කරන ලදී.0.15 සහ අගය<0 .7.如 述, 使用 matlab 脚本 (r2020a, mathworks) 对 对 来自 气管 复合 复合 图像 中 中 lacz 表达 区域 表达 la 表达 区域 表达 表达 表达 表达 表达 表达 区域 表达 表达 <0.35, 饱和度> 0.15 和值 <0.15 的 的.如 述, 自动 matlab 脚本 ((r2020a, mathworks) 来自 每 只 图像 图像 的 的 的 的 的 量化 量化 量化 量化 量化 量化 量化 使用 <0.15,> 0.15 和值 0.15 的 0.15 的 ..... ............. හිප් Области экспрессии LacZ на составных изображениях трахеи каждого животного количественно определяли с использованием автоматизированного сценария MATLAB (R2020a, MathWorks), как описано ранее, с использованием настроек 0,35 <оттенок <0,58, насыщенность> 0,15 и значение <0,7 . 0.35 < hue < 0.58 , සන්තෘප්තිය > 0.15 සහ අගය < 0.7 හි සිටුවම් භාවිතා කර පෙර විස්තර කර ඇති පරිදි ස්වයංක්‍රීය MATLAB ස්ක්‍රිප්ට් (R2020a, MathWorks) භාවිතයෙන් එක් එක් සත්වයාගේ ස්වසනාලයේ සංයුක්ත රූප මත LacZ ප්‍රකාශනයේ ප්‍රදේශ ප්‍රමාණනය කරන ලදී.GIMP v2.10.24 හි පටක සමෝච්ඡයන් ලුහුබැඳීමෙන්, පටක ප්‍රදේශය හඳුනා ගැනීමට සහ ශ්වාසනාලි පටකයෙන් පිටත කිසියම් ව්‍යාජ හඳුනාගැනීමක් වැළැක්වීම සඳහා එක් එක් සංයුක්ත රූපය සඳහා වෙස් මුහුණක් අතින් සාදන ලදී.සෑම සතෙකුගේම සියලුම සංයුක්ත රූපවලින් පැල්ලම් සහිත ප්‍රදේශ එම සත්වයා සඳහා සම්පූර්ණ පැල්ලම් ප්‍රදේශය ලබා දීම සඳහා සාරාංශ කරන ලදී.සාමාන්‍යකරණය වූ ප්‍රදේශයක් ලබා ගැනීම සඳහා තීන්ත ආලේප කරන ලද ප්‍රදේශය වෙස් මුහුණේ මුළු ප්‍රමාණයෙන් බෙදනු ලැබේ.
සෑම ශ්වාසනාලයක්ම පැරෆින් වල තැන්පත් කර ඇති අතර 5 µm ඝණකමින් කොටස් කර ඇත.කොටස් මිනිත්තු 5ක් සඳහා උදාසීන වේගවත් රතු පැහැයෙන් වර්ණාලේප කර ඇති අතර Nikon Eclipse E400 අන්වීක්ෂයක්, DS-Fi3 කැමරාවක් සහ NIS මූලද්‍රව්‍ය ග්‍රහණ මෘදුකාංගයක් (අනුවාදය 5.20.00) භාවිතයෙන් රූප ලබා ගන්නා ලදී.
සියලුම සංඛ්‍යාන විශ්ලේෂණ GraphPad Prism v9 (GraphPad Software, Inc.) හි සිදු කරන ලදී.සංඛ්‍යානමය වැදගත්කම p ≤ 0.05 ලෙස සකසා ඇත.Shapiro-Wilk පරීක්ෂණය භාවිතයෙන් සාමාන්‍යභාවය පරීක්ෂා කරන ලද අතර යුගල නොකළ t-පරීක්‍ෂණයක් භාවිතයෙන් LacZ පැල්ලම් වල වෙනස්කම් තක්සේරු කරන ලදී.
1 වගුවේ විස්තර කර ඇති මන්ත්‍රීවරුන් හය PCXI විසින් පරීක්ෂා කරන ලද අතර, දෘශ්‍යතාව වගුව 2 හි විස්තර කර ඇත. Polystyrene MPs දෙකක් (MP1 සහ MP2; 18 µm සහ 0.25 µm, පිළිවෙලින්) PCXI විසින් දෘශ්‍යමාන නොවූ නමුත් ඉතිරි සාම්පල හඳුනාගත හැකි විය. (උදාහරණ රූප සටහන 5 හි පෙන්වා ඇත).MP3 සහ MP4 දුර්වල ලෙස දෘශ්‍යමාන වේ (10-15% Fe3O4; 0.25 µm සහ 0.9 µm, පිළිවෙලින්).MP5 (98% Fe3O4; 0.25 µm) පරීක්ෂා කරන ලද කුඩාම අංශු කිහිපයක් අඩංගු වුවද, එය වඩාත්ම උච්චාරණය විය.CombiMag MP6 නිෂ්පාදනය වෙන්කර හඳුනා ගැනීමට අපහසුය.සෑම අවස්ථාවකදීම, චුම්බකය කේශනාලිකා වෙත සමාන්තරව එහා මෙහා ගෙන යාමෙන් MF හඳුනාගැනීමේ අපගේ හැකියාව බෙහෙවින් වැඩි දියුණු විය.චුම්බක කේශනාලිකා වලින් ඉවතට ගමන් කරන විට, අංශු දිගු දම්වැල්වලින් පිටතට ඇද දමන ලදී, නමුත් චුම්බක ළඟා වන විට සහ චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය වැඩි වූ විට, අංශු කේශනාලිකා ඉහළ මතුපිට දෙසට සංක්‍රමණය වීමත් සමඟ අංශු දාම කෙටි විය (අතිරේක වීඩියෝ S1 බලන්න. : MP4), පෘෂ්ඨයේ අංශු ඝනත්වය වැඩි කිරීම.අනෙක් අතට, චුම්බකය කේශනාලිකා වලින් ඉවත් කළ විට, ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය අඩු වන අතර මන්ත්‍රීවරුන් කේශනාලිකා ඉහළ පෘෂ්ඨයේ සිට දිගු දම්වැල් වලට නැවත සකස් කරයි (පරිපූරක වීඩියෝ S2: MP4 බලන්න).චුම්බක චලනය නැවැත්වීමෙන් පසුව, අංශු සමතුලිත තත්ත්වයට පැමිණීමෙන් පසු යම් කාලයක් දිගටම ගමන් කරයි.මන්ත්‍රීවරයා කේශනාලිකා ඉහළ මතුපිට දෙසට සහ ඉවතට ගමන් කරන විට, චුම්බක අංශු ද්‍රවය හරහා සුන්බුන් ඇද ගැනීමට නැඹුරු වේ.
PCXI යටතේ MP හි දෘශ්‍යතාව සාම්පල අතර සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් වේ.(a) MP3, (b) MP4, (c) MP5 සහ (d) MP6.මෙහි පෙන්වා ඇති සියලුම රූප ලබාගෙන ඇත්තේ කේශනාලිකා වලට සෘජුවම ඉහලින් මිලිමීටර් 10ක් පමණ ස්ථානගත කර ඇති චුම්බකයකිනි.පෙනෙන විශාල කව යනු කේශනාලිකා තුළ සිරවී ඇති වායු බුබුලු වන අතර, අදියර ප්‍රතිවිරුද්ධ රූපයේ කළු සහ සුදු දාර ලක්ෂණ පැහැදිලිව පෙන්වයි.රතු කොටුවෙහි වෙනස වැඩි කරන විශාලනය පෙන්නුම් කරයි.සියලුම රූපවල චුම්බක පරිපථවල විෂ්කම්භය පරිමාණයට නොගැලපෙන අතර පෙන්වා ඇති ප්‍රමාණයට වඩා 100 ගුණයක් පමණ විශාල බව සලකන්න.
චුම්බකය කේශනාලිකා මුදුන දිගේ වමට සහ දකුණට ගමන් කරන විට, එම්පී තන්තුවේ කෝණය චුම්බකයට සමපාත වීමට වෙනස් වේ (රූපය 6 බලන්න), එමඟින් චුම්බක ක්ෂේත්‍ර රේඛා නිරූපණය කරයි.MP3-5 සඳහා, ස්වරය එළිපත්ත කෝණයට ළඟා වූ පසු, අංශු කේශනාලිකා ඉහළ මතුපිට දිගේ ඇදගෙන යයි.මෙය බොහෝ විට චුම්බක ක්ෂේත්‍රය ප්‍රබලව ඇති ස්ථානයට ආසන්නව මන්ත්‍රීවරුන් විශාල කණ්ඩායම් වලට පොකුරු ගැසීමට හේතු වේ (පරිපූරක වීඩියෝ S3: MP5 බලන්න).මන්ත්‍රීවරයා ද්‍රව-වායු අතුරුමුහුණතෙහි ඒකරාශී වීමට සහ සංකේන්ද්‍රණය වීමට හේතු වන කේශනාලිකා අවසානයට ආසන්නව රූපගත කිරීමේදී මෙය විශේෂයෙන් පැහැදිලි වේ.MP3-5 හි ඇති අංශුවලට වඩා වෙන්කර හඳුනා ගැනීමට අපහසු වූ MP6 හි ඇති අංශු, චුම්බකය කේශනාලිකා දිගේ ගමන් කරන විට ඇදී ගියේ නැත, නමුත් MP තන්තු විඝටනය වී, අංශු දර්ශනය වීමට ඉඩ හැරියේය (පරිපූරක වීඩියෝ S4: MP6 බලන්න).සමහර අවස්ථාවල දී, චුම්බකය රූපගත කරන ස්ථානයෙන් බොහෝ දුරකට ගෙන යාමෙන් ව්‍යවහාරික චුම්භක ක්ෂේත්‍රය අඩු වූ විට, ඉතිරි මන්ත්‍රීවරු ගුරුත්වාකර්ෂණය මගින් නළයේ පහළ මතුපිටට සෙමින් බැස, නූලෙහි ඉතිරිව ඇත (පරිපූරක වීඩියෝ S5: MP3 බලන්න) .
චුම්බකය කේශනාලිකාට ඉහලින් දකුණට ගමන් කරන විට MP නූලෙහි කෝණය වෙනස් වේ.(a) MP3, (b) MP4, (c) MP5 සහ (d) MP6.රතු කොටුවෙහි වෙනස වැඩි කරන විශාලනය පෙන්නුම් කරයි.මෙම ස්ථිතික රූපවල දෘශ්‍යමාන කළ නොහැකි වැදගත් අංශු ව්‍යුහය සහ ගතික තොරතුරු හෙළි කරන බැවින් අමතර වීඩියෝ තොරතුරු අරමුණු සඳහා බව කරුණාවෙන් සලකන්න.
අපගේ පරීක්ෂණ මගින් පෙන්නුම් කර ඇත්තේ චුම්බකය චලනය වන විට චුම්බකය සෙමින් චලනය වන අතර එය vivo හි සංකීර්ණ චලනයේ සන්දර්භය තුළ MF දෘශ්‍යකරණයට පහසුකම් සපයන බවයි.Polystyrene beads (MP1 සහ MP2) කේශනාලිකා තුළ නොපෙනෙන නිසා in vivo පරීක්ෂණ සිදු කර නොමැත.ඉතිරි එම්එෆ් හතරෙන් එක් එක් චුම්බකයේ දිගු අක්ෂය මගින් 30° පමණ සිරස් අතට (රූප සටහන 2b සහ 3a බලන්න) trachea මත ස්ථානගත කර ඇති පරිදි vivo තුළ පරීක්‍ෂා කරන ලදී. චුම්බකයකට වඩා..වින්‍යාසය අවසන් විය.MP3, MP4 සහ MP6 කිසිදු සජීවී සතෙකුගේ ස්වසනාලයේ හමු වී නොමැත.සතුන් මානුෂික ලෙස මරා දැමීමෙන් පසු මීයන්ගේ ශ්වසන මාර්ගය දෘශ්‍යමාන කිරීමේදී, සිරින්ජ පොම්පයක් භාවිතයෙන් අමතර පරිමාවක් එකතු කළ විට පවා අංශු නොපෙනී ගියේය.MP5 හි වැඩිම යකඩ ඔක්සයිඩ් අන්තර්ගතයක් ඇති අතර දෘශ්‍යමාන එකම අංශුව එය විය, එබැවින් එය vivo තුළ MP හැසිරීම ඇගයීමට සහ සංලක්ෂිත කිරීමට භාවිතා කරන ලදී.
MF ඇතුළු කිරීමේදී චුම්බකය trachea මත ස්ථානගත කිරීම නිසා බොහෝ, නමුත් සියල්ලම නොවේ, MFs දර්ශන ක්ෂේත්‍රයේ සංකේන්ද්‍රණය වී ඇත.අංශු වල ට්‍රේචල් ඇතුල්වීම වඩාත් හොඳින් නිරීක්ෂණය කරනු ලබන්නේ මානුෂික ලෙස දයානුකම්පිත කරන ලද සතුන් තුළ ය.රූප සටහන 7 සහ පරිපූරක වීඩියෝ S6: MP5 මගින් පෙන්නුම් කරන්නේ ශීඝ්‍ර චුම්භක ග්‍රහණය සහ උදරීය ස්වසනාලයේ මතුපිට අංශු පෙළගැස්වීම, මන්ත්‍රීවරුන් ස්වසනාලයේ අපේක්ෂිත ප්‍රදේශ වෙත ඉලක්ක කළ හැකි බව පෙන්නුම් කරයි.MF ප්‍රසූතියෙන් පසු trachea දිගේ වඩාත් දුරින් සෙවූ විට, සමහර MFs carina ට ආසන්නව හමු වූ අතර, එමඟින් පෙන්නුම් කරන්නේ සියලුම MF එකතු කර රඳවා තබා ගැනීමට ප්‍රමාණවත් චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තියක් නොමැති බවයි, මන්ද ඒවා තරල පරිපාලනයේදී උපරිම චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය ඇති කලාපය හරහා ලබා දෙන බැවිනි.ක්රියාවලිය.කෙසේ වෙතත්, පශ්චාත් ප්‍රසව මන්ත්‍රී සාන්ද්‍රණය රූප ප්‍රදේශය වටා වැඩි වූ අතර, බොහෝ මන්ත්‍රීවරුන් ව්‍යවහාරික චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය ඉහළම වායු මාර්ග කලාපවල රැඳී සිටි බව යෝජනා කරයි.
(a) පෙර සහ (b) MP5 මෑතකදී euthanized මීයෙකුගේ ශ්වාසනාලය තුළට ලබා දීමෙන් පසු, රූප පෙදෙසට මදක් ඉහළින් චුම්බකයක් තබා ඇත.නිරූපිත ප්රදේශය කාටිලේජීය මුදු දෙකක් අතර පිහිටා ඇත.මන්ත්‍රීවරයා ප්‍රසූත කිරීමට පෙර වාතයේ යම් දියරයක් තිබේ.රතු කොටුවෙහි වෙනස වැඩි කරන විශාලනය පෙන්නුම් කරයි.මෙම රූප ලබාගෙන ඇත්තේ S6: MP5 පරිපූරක වීඩියෝවේ අන්තර්ගත වීඩීයෝවෙන්.
චුම්බකය vivo තුළ trachea දිගේ ගෙන යාමේ ප්‍රතිඵලයක් ලෙස කේශනාලිකා වල නිරීක්ෂණය කරන ලද ආකාරයටම ගුවන් මාර්ග මතුපිට MP දාමයේ කෝණය වෙනස් විය (රූපය 8 සහ අතිරේක වීඩියෝ S7: MP5 බලන්න).කෙසේ වෙතත්, අපගේ අධ්‍යයනයේදී, කේශනාලිකා වලට කළ හැකි පරිදි, සජීවී ශ්වසන පත්‍රිකා මතුපිටින් මන්ත්‍රීවරුන් ඇදගෙන යා නොහැකි විය.සමහර අවස්ථාවලදී, චුම්බකය වමට සහ දකුණට ගමන් කරන විට MP දාමය දිගු වේ.චුම්බකය ස්වසනාලය දිගේ කල්පවත්නා ලෙස චලනය වන විට අංශු දාමය තරලයේ මතුපිට ස්ථරයේ ගැඹුර වෙනස් කරන බවත්, චුම්බකය කෙලින්ම ඉහළට ගෙන ගොස් අංශු දාමය සිරස් ස්ථානයකට කරකවන විට ප්‍රසාරණය වන බවත් අපි සොයා ගත්තෙමු (බලන්න. අතිරේක වීඩියෝ S7).: MP5 0:09 ට, පහළ දකුණ).චුම්බකය ස්වසනාලයේ මුදුන හරහා පාර්ශ්වීයව ගෙන ගිය විට (එනම්, ස්වසනාලයේ දිග දිගේ නොව සතාගේ වමට හෝ දකුණට) ලාක්ෂණික චලන රටාව වෙනස් විය.අංශු ඒවායේ චලනය අතරතුර තවමත් පැහැදිලිව දැකගත හැකි නමුත්, චුම්බකය ස්වසනාලයෙන් ඉවත් කළ විට, අංශු නූල්වල ඉඟි දෘශ්‍යමාන විය (0:08 සිට ආරම්භ වන පරිපූරක වීඩියෝ S8: MP5 බලන්න).වීදුරු කේශනාලිකා තුළ ව්යවහාරික චුම්බක ක්ෂේත්රයක ක්රියාකාරිත්වය යටතේ චුම්බක ක්ෂේත්රයේ නිරීක්ෂණය කරන ලද හැසිරීම් සමඟ මෙය එකඟ වේ.
සජීවී නිර්වින්දනය කළ මීයෙකුගේ ශ්වාසනාලයේ MP5 පෙන්වන නියැදි රූප.(අ) චුම්බකය භාවිතා කරනුයේ ශ්වාසනාලයේ ඉහළින් සහ වම් පසින් රූප ලබා ගැනීමටය, පසුව (ආ) චුම්බකය දකුණට ගෙන යාමෙන් පසුවය.රතු කොටුවෙහි වෙනස වැඩි කරන විශාලනය පෙන්නුම් කරයි.මෙම පින්තූර S7 හි අතිරේක වීඩියෝ: MP5 හි ඇති වීඩියෝවෙන් වේ.
ධ්‍රැව දෙක ස්වසනාලයට උඩින් සහ පහළින් උතුරු-දකුණු දිශානතියක සුසර කළ විට (එනම්, ආකර්ෂණය; පය. 3b), MP තාර දිගුව දිස් වූ අතර, එය ස්වසනාලයේ පෘෂ්ඨීය මතුපිටට වඩා ස්වසනාලයේ පාර්ශ්වීය බිත්තිය මත පිහිටා ඇත. trachea (උපග්රන්ථය බලන්න).වීඩියෝ S9:MP5).කෙසේ වෙතත්, සාමාන්‍යයෙන් තනි චුම්බක උපාංගයක් සමඟ සිදු වන ද්විත්ව චුම්බක උපාංගයක් භාවිතයෙන් තරල පරිපාලනය කිරීමෙන් පසු එක් ස්ථානයක (එනම්, ස්වසනාලයේ පෘෂ්ඨීය මතුපිට) අංශුවල ඉහළ සාන්ද්‍රණයක් අනාවරණය නොවීය.ඉන්පසුව, එක් චුම්බකයක් ප්‍රතිවිරුද්ධ ධ්‍රැව විකර්ෂණය කිරීමට වින්‍යාස කළ විට (රූපය 3c), බෙදා හැරීමෙන් පසු දර්ශන ක්ෂේත්‍රයේ දෘශ්‍ය අංශු ගණන වැඩි නොවීය.චුම්බක වින්‍යාස දෙකම සැකසීම අභියෝගාත්මක වන්නේ පිළිවෙළින් චුම්බක ආකර්ෂණය කරන හෝ තල්ලු කරන ඉහළ චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය හේතුවෙනි.පසුව සැකසුම ගුවන් මාර්ගවලට සමාන්තරව තනි චුම්බකයකට වෙනස් කරන ලද නමුත් අංශක 90 ක කෝණයකින් ගුවන් මාර්ග හරහා ගමන් කරන අතර එමඟින් බලයේ රේඛා ශ්වසන බිත්තිය විකලාංග ලෙස තරණය කරයි (රූපය 3d), අංශු ඒකරාශී වීමේ හැකියාව තීරණය කිරීමට අදහස් කරන දිශානතිය. පාර්ශ්වීය බිත්තිය.නිරීක්ෂණය කළ යුතුය.කෙසේ වෙතත්, මෙම වින්‍යාසය තුළ, හඳුනාගත හැකි MF සමුච්චය චලනයක් හෝ චුම්බක චලනයක් නොතිබුණි.මෙම සියලු ප්‍රතිඵල මත පදනම්ව, ජාන වාහක පිළිබඳ vivo අධ්‍යයනය සඳහා තනි චුම්බකයක් සහ අංශක 30 දිශානතියක් සහිත වින්‍යාසයක් තෝරා ගන්නා ලදී (රූපය 3a).
මානුෂීය ලෙස බිලි දුන් වහාම සත්වයා කිහිප වතාවක්ම රූපගත කළ විට, බාධා කරන පටක චලිතයක් නොමැති වීමෙන් අදහස් කළේ චුම්බකයේ පරිවර්තන චලිතයට අනුකූලව 'පැද්දීම' පැහැදිලි අන්තර් කාටිලේජ ක්ෂේත්‍රයේ සියුම්, කෙටි අංශු රේඛා හඳුනා ගත හැකි බවයි.MP6 අංශු වල පැවැත්ම සහ චලනය පැහැදිලිව දකින්න.
LV-LacZ හි ටයිටරය 1.8 x 108 IU/mL වූ අතර, CombiMag MP (MP6) සමඟ 1:1 මිශ්‍ර කිරීමෙන් පසු, සතුන්ට LV වාහනයේ 9 x 107 IU/ml (එනම් 4.5) ට්‍රේචල් මාත්‍රාවකින් 50 µl එන්නත් කරන ලදී. x 106 TU/rat).)).මෙම අධ්‍යයනයන්හිදී, ශ්‍රමය අතරතුර චුම්බකය චලනය කරනවා වෙනුවට, චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් නොමැති විට දෛශික බෙදා හැරීමට සාපේක්ෂව LV සම්ප්‍රේෂණය වැඩිදියුණු කළ හැකිද, සහ (b) වාතයට හැකි නම්, අපි චුම්බකය එක් ස්ථානයක සවි කළෙමු. අවධානය යොමු කළ යුතුය.ඉහළ ශ්වසන පත්රිකාවේ චුම්බක ඉලක්කගත ප්රදේශවල සෛල සම්ප්රේෂණය වේ.
අපගේ සම්මත LV දෛශික බෙදාහැරීමේ ප්‍රොටෝකෝලය මෙන්, චුම්බක පැවතීම සහ LV දෛශික සමඟ ඒකාබද්ධව CombiMag භාවිතා කිරීම සත්ව සෞඛ්‍යයට අහිතකර ලෙස බලපාන්නේ නැත.යාන්ත්‍රික කැළඹීමට ලක් වූ ට්‍රේචල් කලාපයේ ඉදිරිපස රූප (පරිපූරක පය. 1) පෙන්නුම් කළේ LV-MP ප්‍රතිකාර කළ කණ්ඩායමට චුම්බකයක් (රූපය 9a) ඉදිරියේ සැලකිය යුතු ලෙස ඉහළ සම්ප්‍රේෂණ මට්ටමක් ඇති බවයි.පාලක කන්ඩායමේ තිබුනේ නිල් LacZ පැල්ලම් කුඩා ප්රමාණයක් පමණි (රූපය 9b).X-Gal-stained normalized zones ප්‍රමාණ කිරීම පෙන්නුම් කළේ චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ LV-MP පරිපාලනය කිරීමෙන් ආසන්න වශයෙන් 6 ගුණයක වැඩි දියුණුවක් ඇති වූ බවයි (රූපය 9c).
LV-MP (a) චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ සහ (b) චුම්බකයක් නොමැති විට ට්‍රේචල් සම්ප්‍රේෂණය පෙන්වන සංයුක්ත රූපවල උදාහරණය.(ඇ) චුම්බකයක් භාවිතයෙන් (*p = 0.029, t-test, n = 3 කණ්ඩායමකට, මධ්‍යන්‍යයේ ± සම්මත දෝෂය මධ්‍යන්‍ය) මගින් trachea හි LacZ සම්ප්‍රේෂණයේ සාමාන්‍යකරණය වූ ප්‍රදේශයේ සංඛ්‍යානමය වශයෙන් සැලකිය යුතු දියුණුවක්.
උදාසීන වේගවත් රතු පැල්ලම් සහිත කොටස් (උදාහරණයක් පරිපූරක පය. 2 හි පෙන්වා ඇත) LacZ-stained සෛල එම සාම්පලයේ සහ කලින් වාර්තා කළ ස්ථානයේම පවතින බව පෙන්නුම් කරයි.
වාහක ජාන ප්‍රතිකාරයේ ප්‍රධාන අභියෝගය වන්නේ උනන්දුවක් දක්වන ක්ෂේත්‍රවල වාහක අංශු නිවැරදිව ස්ථානගත කිරීම සහ වාතය ගලායාම සහ ක්‍රියාකාරී ශ්ලේෂ්මල නිෂ්කාශනය ඉදිරියේ ජංගම පෙනහළුවල ඉහළ මට්ටමේ සම්ප්‍රේෂණ කාර්යක්ෂමතාවයක් ලබා ගැනීමයි.සිස්ටික් ෆයිබ්‍රෝසිස් හි ශ්වසන රෝග සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා අදහස් කරන LV වාහකයන් සඳහා, සන්නායක ගුවන් මාර්ගවල වාහක අංශුවල පදිංචි කාලය වැඩි කිරීම මෙතෙක් අත් කරගත නොහැකි ඉලක්කයක් වී ඇත.Castellani et al විසින් පෙන්වා දී ඇති පරිදි, සම්ප්‍රේෂණය වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා චුම්බක ක්ෂේත්‍ර භාවිතය විද්‍යුත් විච්ඡේදනය වැනි අනෙකුත් ජාන බෙදා හැරීමේ ක්‍රමවලට වඩා වාසි ඇත, මන්ද එයට සරල බව, ආර්ථිකය, දේශීයකරණය කළ බෙදා හැරීම, වැඩි කාර්යක්ෂමතාව සහ කෙටි පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කාලය ඒකාබද්ධ කළ හැකිය.සහ සමහරවිට වාහනයේ අඩු මාත්‍රාවක් 10.කෙසේ වෙතත්, vivo තුළ බාහිර චුම්බක බලවේගවල බලපෑම යටතේ වාතයේ ඇති චුම්බක අංශු තැන්පත් වීම සහ හැසිරීම කිසි විටෙකත් විස්තර කර නොමැති අතර, ඇත්ත වශයෙන්ම මෙම ක්‍රමයට නොවෙනස්ව ජීවත්වන ගුවන් මාර්ගවල ජාන ප්‍රකාශන මට්ටම් වැඩි කිරීමට ඇති හැකියාව vivo තුළ ප්‍රදර්ශනය කර නොමැත.
PCXI synchrotron මත අපගේ in vitro පරීක්ෂණවලින් පෙන්නුම් කළේ MP polystyrene හැර, අප විසින් පරීක්ෂා කරන ලද සියලුම අංශු, අප භාවිතා කළ රූප සැකසීමේ දී දෘශ්‍යමාන වන බවයි.චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරිපිටදී, චුම්බක ක්ෂේත්‍ර නූල් සාදයි, එහි දිග අංශු වර්ගයට සහ චුම්බක ක්ෂේත්‍රයේ ශක්තියට (එනම් චුම්බකයේ සමීපත්වය සහ චලනය) සම්බන්ධ වේ.රූප සටහන 10 හි පෙන්වා ඇති පරිදි, අප නිරීක්ෂණය කරන නූල් සෑදී ඇත්තේ එක් එක් අංශුව චුම්භක වන අතර එහි ප්‍රාදේශීය චුම්බක ක්ෂේත්‍රය ප්‍රේරණය වීමෙනි.මෙම වෙන්වූ ක්ෂේත්‍ර මගින් අනෙකුත් අංශු ආකර්ශනය සහ විකර්ෂණය යන ප්‍රාදේශීය බල වලින් දේශීය බලවේග නිසා සමූහ තන්තු චලිතයන් සමඟ අනෙකුත් සමාන අංශු එකතු කර සම්බන්ධ වීමට හේතු වේ.
(a, b) ද්‍රව පිරවූ කේශනාලිකා තුළ ඇති වන අංශු දාම සහ (c, d) වාතයෙන් පිරුණු ස්වසනාලයක් පෙන්වන රූප සටහන.කේශනාලිකා සහ ශ්වාසනාලය පරිමාණයට ඇදී නොයන බව සලකන්න.පැනලයේ (a) දම්වැල්වල සකස් කර ඇති Fe3O4 අංශු අඩංගු MF පිළිබඳ විස්තරයක් ද අඩංගු වේ.
චුම්බකය කේශනාලිකා හරහා ගමන් කරන විට, අංශු තන්තුවේ කෝණය Fe3O4 අඩංගු MP3-5 සඳහා තීරණාත්මක සීමාවට ළඟා වූ අතර, ඉන් පසුව අංශු තන්තුව එහි මුල් ස්ථානයේ නොපවතින නමුත් මතුපිට දිගේ නව ස්ථානයකට ගමන් කරයි.චුම්බකය.වීදුරු කේශනාලිකා මතුපිට මෙම චලනය සිදුවීමට ඉඩ සලසන තරම් සුමට බැවින් මෙම බලපෑම ඇති විය හැක.සිත්ගන්නා කරුණ නම්, MP6 (CombiMag) මේ ආකාරයෙන් හැසිරුණේ නැත, සමහර විට අංශු කුඩා වීම, වෙනස් ආලේපනයක් හෝ මතුපිට ආරෝපණයක් තිබීම හෝ හිමිකාර වාහක තරලය ඔවුන්ගේ චලනය වීමේ හැකියාවට බලපෑවේය.CombiMag අංශු රූපයේ ඇති ප්‍රතිවිරෝධය ද දුර්වල වන අතර, එයින් ඇඟවෙන්නේ ද්‍රව සහ අංශු එකම ඝනත්වයක් තිබිය හැකි බවත් එම නිසා පහසුවෙන් එකිනෙකා දෙසට ගමන් කළ නොහැකි බවත්ය.චුම්භක ක්ෂේත්‍ර ශක්තියට සෑම විටම ද්‍රවයේ අංශු අතර ඝර්ෂණය ජය ගත නොහැකි බව පෙන්නුම් කරමින් චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය සහ චුම්බකය සහ ඉලක්ක ප්‍රදේශය අතර දුර නොපැමිණිය යුතු බව පෙන්නුම් කරමින් චුම්බකය ඉතා වේගයෙන් චලනය වුවහොත් අංශු ද හිර විය හැක. පුදුමය.වැදගත්.මෙම ප්‍රතිඵල මගින් පෙන්නුම් කරන්නේ චුම්බක මගින් ඉලක්ක ප්‍රදේශය හරහා ගලා යන බොහෝ ක්ෂුද්‍ර අංශු ග්‍රහණය කර ගත හැකි වුවද, කොම්බිමැග් අංශු ස්වසනාලයේ මතුපිට චලනය කිරීමට චුම්බක මත විශ්වාසය තැබිය නොහැකි බවයි.මේ අනුව, vivo LV MF අධ්‍යයනයන්හි දී වාතයේ ගසෙහි නිශ්චිත ප්‍රදේශ භෞතිකව ඉලක්ක කිරීම සඳහා ස්ථිතික චුම්බක ක්ෂේත්‍ර භාවිතා කළ යුතු බව අපි නිගමනය කළෙමු.
අංශු ශරීරයට ලබා දුන් පසු, ශරීරයේ සංකීර්ණ චලනය වන පටක සන්දර්භය තුළ ඒවා හඳුනා ගැනීමට අපහසු වේ, නමුත් ඒවායේ හඳුනාගැනීමේ හැකියාව වැඩි දියුණු කර ඇත්තේ චුම්බකය තිරස් අතට trachea හරහා ගෙනයාමෙන් MP තන්තු "විගල්" කිරීමටය.තත්‍ය කාලීන රූපකරණය කළ හැකි වුවද, සත්වයා මානුෂික ලෙස මරා දැමීමෙන් පසු අංශු චලනය හඳුනා ගැනීම පහසුය.සමහර අංශු සාමාන්‍යයෙන් ස්වසනාලයේ පහළින් දක්නට ලැබුණද, චුම්බකය නිරූපණ ප්‍රදේශය මත ස්ථානගත වූ විට MP සාන්ද්‍රණය සාමාන්‍යයෙන් මෙම ස්ථානයේ ඉහළම විය.in vitro අධ්‍යයනයන් මෙන් නොව, චුම්බක චලනය මගින් අංශු trachea පහළට ඇද දැමිය නොහැක.මෙම සොයා ගැනීම ස්වසනාලයේ මතුපිට ආවරණය වන ශ්ලේෂ්මල ආශ්වාස කරන අංශු සාමාන්‍යයෙන් සකසන ආකාරය සමඟ අනුකූල වේ, ඒවා ශ්ලේෂ්මලයට හසු කර පසුව ශ්ලේෂ්මල-සිලියරි නිෂ්කාශන යාන්ත්‍රණය හරහා ඒවා ඉවත් කරයි.
අපි උපකල්පනය කළේ ආකර්ෂණය සඳහා ස්වසනාලයට ඉහළින් සහ පහළින් චුම්බක භාවිතා කිරීම (රූපය 3b) චුම්බක ක්ෂේත්‍රයකට වඩා වැඩි ඒකාකාර චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඇති කළ හැකි අතර, එක් ලක්ෂ්‍යයක වැඩි වශයෙන් සංකේන්ද්‍රණය වී අංශු ඒකාකාර ව්‍යාප්තියකට හේතු විය හැක..කෙසේ වෙතත්, අපගේ මූලික අධ්‍යයනයෙන් මෙම උපකල්පනය සනාථ කිරීමට පැහැදිලි සාක්ෂි හමු නොවීය.ඒ හා සමානව, විකර්ෂණය සඳහා චුම්බක යුගලයක් සැකසීම (රූපය 3c) රූපයේ ප්‍රදේශයේ වැඩි අංශු තැන්පත් වීමට හේතු නොවේ.මෙම සොයාගැනීම් දෙකෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ ද්විත්ව චුම්බක සැකසුම මගින් MP පොයින්ටින් හි දේශීය පාලනය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩිදියුණු නොකරන බවත්, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ලැබෙන ප්‍රබල චුම්බක බලවේග සුසර කිරීමට අපහසු බවත්, මෙම ප්‍රවේශය අඩු ප්‍රායෝගික බවට පත් කරන බවත්ය.ඒ හා සමානව, චුම්බකය ස්වසනාලයට ඉහළින් සහ හරහා දිශානතියට පත් කිරීම (රූපය 3d) ද රූපගත කළ ප්‍රදේශයේ ඉතිරිව ඇති අංශු ගණන වැඩි නොවේ.මෙම විකල්ප වින්‍යාසයන්ගෙන් සමහරක් තැන්පත් කලාපයේ චුම්බක ක්ෂේත්‍ර ශක්තිය අඩුවීමට හේතු වන බැවින් ඒවා සාර්ථක නොවිය හැක.මේ අනුව, අංශක 30 (රූපය 3a) හි තනි චුම්බක වින්‍යාසය vivo පරීක්ෂණ ක්‍රමයේ සරලම හා කාර්යක්ෂම ලෙස සැලකේ.
LV-MP අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කළේ LV දෛශික CombiMag සමඟ ඒකාබද්ධ කර චුම්බක ක්ෂේත්‍රයක් ඉදිරියේ භෞතිකව බාධා කිරීමෙන් පසුව ලබා දුන් විට, පාලනයන්ට සාපේක්ෂව ට්‍රාචාහි සම්ප්‍රේෂණ මට්ටම් සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වූ බවයි.සමමුහුර්ත රූප අධ්‍යයනයන් සහ LacZ ප්‍රතිඵල මත පදනම්ව, චුම්බක ක්ෂේත්‍රය LV ශ්වාසනාලය තුළ තබා ගැනීමටත්, පෙනහළුවලට ගැඹුරට ක්ෂණිකව විනිවිද යන දෛශික අංශු ගණන අඩු කිරීමටත් හැකි බව පෙනී ගියේය.එවැනි ඉලක්කගත වැඩිදියුණු කිරීම් බෙදාහැරීමේ ටයිටර, ඉලක්කගත නොවන සම්ප්‍රේෂණය, ගිනි අවුලුවන සහ ප්‍රතිශක්තිකරණ අතුරු ආබාධ සහ ජාන හුවමාරු පිරිවැය අඩු කරන අතරම ඉහළ කාර්යක්ෂමතාවයකට හේතු විය හැක.වැදගත් ලෙස, නිෂ්පාදකයාට අනුව, CombiMag වෙනත් වෛරස් වාහක (AAV වැනි) සහ න්යෂ්ටික අම්ල ඇතුළු අනෙකුත් ජාන හුවමාරු ක්රම සමඟ ඒකාබද්ධව භාවිතා කළ හැක.